2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑作用，為2x 預(yù)混液等特點，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分品牌，可減少操作步驟記得牢，縮短加樣時間組建，降低污染幾率。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶，配合精心優(yōu)化的Buffer體系進展情況，有效抑制非特異性擴(kuò)增重要的作用。2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
目錄號：71321
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71321-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71321-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x SYBR qPCR Mix | 5x 1ml | 25x 1ml |
保存條件
-20℃保存，有效期 24 個月研究。使用前搶抓機遇，充分融解，輕柔顛倒混勻去創新，短期使用可放在4 ℃結論，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品簡介
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑體系，為2x 預(yù)混液足夠的實力，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分，可減少操作步驟提高，縮短加樣時間全面闡釋，降低污染幾率。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶生產能力，配合精心優(yōu)化的Buffer體系智慧與合力，有效抑制非特異性擴(kuò)增，可對寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量可持續，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果措施，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)情況、穩(wěn)定性好等特點。
本品不含參比染料ROX，適用于不需要ROX校準(zhǔn)的儀器完善好，常見的是Bio-rad系列、Roche供給、國產(chǎn)qPCR儀全過程。Roche、國產(chǎn)qPCR儀積極參與。
操作步驟：
1. 將DNA模板優勢領先、引物、2 x SYBR qPCR Mix探討、ddH2O溶解并置于冰上備用新技術。
2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系：（以20μl反應(yīng)體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2x SYBR qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
ddH2O | Up to 20 μl | Not applicable |
注意：
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系，cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%共創美好，基因組DNA的量為10-100 ng趨勢。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同，可對模板進(jìn)行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量。
2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM有力扭轉，就可以得到較好的結(jié)果，反應(yīng)效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整深入。擴(kuò)增效率不高的情況下形式，可提高引物濃度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時一站式服務，可降低引物濃度功能，由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
3. qPCR反應(yīng)程序
注意：
1） 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng)支撐作用，絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果積極性。一般來說，二步法擴(kuò)增特異性高，三步法擴(kuò)增效率高也逐步提升。如果融鏈曲線較差，可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度能力和水平；如果因使用Tm值較低的引物等原因組織了，得不到良好的實驗結(jié)果時，可嘗試加長延伸時間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增註入了新的力量。
2） 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸（退火）溫度的設(shè)定表現；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調(diào)整。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定說服力。
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
