2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專(zhuān)用的qPCR試劑不負眾望，為2x 預(yù)混液雙重提升，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分處理方法，可減少操作步驟善於監督，縮短加樣時(shí)間大局，降低污染幾率。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶數據，配合精心優(yōu)化的Buffer體系效率和安，有效抑制非特異性擴(kuò)增。2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
目錄號(hào)：71321
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71321-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71321-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x SYBR qPCR Mix | 5x 1ml | 25x 1ml |
保存條件
-20℃保存邁出了重要的一步，有效期 24 個(gè)月產能提升。使用前，充分融解品牌，輕柔顛倒混勻適應能力，短期使用可放在4 ℃，避免反復(fù)凍融保持穩定。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專(zhuān)用的qPCR試劑就此掀開，為2x 預(yù)混液，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分，可減少操作步驟總之，縮短加樣時(shí)間，降低污染幾率紮實做。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶足了準備，配合精心優(yōu)化的Buffer體系，有效抑制非特異性擴(kuò)增支撐作用，可對(duì)寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量穩步前行，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果，具有靈敏度高著力提升、特異性強(qiáng)指導、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。
本品不含參比染料ROX動手能力，適用于不需要ROX校準(zhǔn)的儀器服務品質，常見(jiàn)的是Bio-rad系列、Roche、國(guó)產(chǎn)qPCR儀助力各行。Roche經過、國(guó)產(chǎn)qPCR儀。
操作步驟：
1. 將DNA模板互動互補、引物核心技術體系、2 x SYBR qPCR Mix、ddH2O溶解并置于冰上備用力度。
2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系：（以20μl反應(yīng)體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2x SYBR qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
ddH2O | Up to 20 μl | Not applicable |
注意：
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系新產品，cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%，基因組DNA的量為10-100 ng性能。因不同種類(lèi)的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同建議，可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)源_定最佳的模板使用量。
2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM設計，就可以得到較好的結(jié)果，反應(yīng)效果不佳時(shí)可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。擴(kuò)增效率不高的情況下善謀新篇，可提高引物濃度推進高水平；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)，可降低引物濃度供給，由此優(yōu)化反應(yīng)體系不斷發展。
3. qPCR反應(yīng)程序
注意：
1） 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng)，絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果拓展應用。一般來(lái)說(shuō)非常重要，二步法擴(kuò)增特異性高，三步法擴(kuò)增效率高自動化方案。如果融鏈曲線(xiàn)較差行動力，可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度；如果因使用Tm值較低的引物等原因空間廣闊，得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)落到實處，可嘗試加長(zhǎng)延伸時(shí)間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。
2） 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸（退火）溫度的設(shè)定；
3） 延伸（退火&延伸）時(shí)間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時(shí)間自行調(diào)整營造一處。
4） 融解曲線(xiàn)分析請(qǐng)以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
