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Universal SYBR Green qPCR Mix熒光定量

  • 型   號(hào):71600
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2025-04-23
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

2× Universal SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I嵌合染料法專用的qPCR試劑支撐作用,為2x預(yù)混液進展情況,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分助力各業,可減少操作步驟,縮短加樣時(shí)間延伸,降低污染幾率有很大提升空間。
Universal SYBR Green qPCR Mix熒光定量

2 x Universal SYBR Green qPCR Mix

 


Universal SYBR Green qPCR Mix熒光定量

目錄號(hào):71600

產(chǎn)品內(nèi)容

Components

71600-500

500 rxns (20 μl/rxn)

71600-2500

2500 rxns(20μl/rxn)

2x Universal SYBR GreenqPCRMix

1 ml x5

1 ml x25

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個(gè)月。使用前情況正常,充分融解,輕輕顛倒混勻聯動,短期使用可放在4℃各領域,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

2× Universal SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I嵌合染料法專用的qPCR試劑技術特點,為2x預(yù)混液的有效手段,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟保持競爭優勢,縮短加樣時(shí)間真正做到,降低污染幾率。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶方案,配合精心優(yōu)化的Buffer體系追求卓越,有效抑制非特異性擴(kuò)增,可對(duì)寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量創新延展,獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果性能,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)長效機製、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)強化意識。

預(yù)混液中含有通用型ROX,適用于所有qPCR儀像一棵樹,使用qPCR Mix時(shí)不需要額外添加ROX來校正儀器協同控製。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物高效利用、2 x Universal SYBR Green qPCR Mix體驗區、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用去突破。

2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系:(以20μl反應(yīng)體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2 x Universal SYBR Green qPCR Mix

10 μl

DNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

RNase free H2O

Up to 20 μl

Not applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系,cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%提供了遵循,基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同,可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋重要作用,以確定最佳的模板使用量堅持先行。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM講實踐,就可以得到較好的結(jié)果增幅最大,反應(yīng)效果不佳時(shí)可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。擴(kuò)增效率不高的情況下最為顯著,可提高引物濃度滿意度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí),可降低引物濃度生產能力,由此優(yōu)化反應(yīng)體系智慧與合力。

3. qPCR反應(yīng)程序

注意:

1) 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng),絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果可持續。一般來說措施,二步法擴(kuò)增特異性高,三步法擴(kuò)增效率高情況。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因堅持好,得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)開放要求,可嘗試加長(zhǎng)延伸時(shí)間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。

2) 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸(退火)溫度的設(shè)定構建;

3) 延伸(退火&延伸)時(shí)間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時(shí)間自行調(diào)整緊密相關。

4) 融解曲線分析請(qǐng)以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。

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Universal SYBR Green qPCR Mix熒光定量

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