2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量
2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) 是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑重要手段，為2x 預(yù)混液成就，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分飛躍，可減少操作步驟緊迫性，縮短加樣時間質生產力，降低污染幾率。2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量
2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX)
2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量
目錄號:71611
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71611-500 500rxns(20μl/rxn) | 71611-2500 2500rxns(20μl/rxn) |
2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) | 1.25 ml x4 | 1.25 ml x20 |
RNase-Free H2O | 5 ml | 5 ml x5 |
保存條件
-20℃保存非常激烈，有效期 24 個月提升行動。使用前，充分融解喜愛，輕輕顛倒混勻環境，短期使用可放在 4 ℃，避免反復(fù)凍融保障。
產(chǎn)品簡介
2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) 是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑重要的角色，為2x 預(yù)混液，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分體製，可減少操作步驟要落實好，縮短加樣時間，降低污染幾率向好態勢。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶相對簡便，配合精心優(yōu)化的Buffer體系，有效抑制非特異性擴(kuò)增更默契了，可對寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量特性，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果，具有靈敏度高流程、特異性強共創輝煌、穩(wěn)定性好等特點。
預(yù)混液中已加入高濃度的ROX參比染料等特點，適用于ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT and 7900HT Fast,ABI Step One, ABI Step One Plus以及其它需要高濃度ROX機(jī)型使用。
操作步驟：
1. 將DNA模板、引物順滑地配合、2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX)更加完善、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。
2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系：（以20μl反應(yīng)體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
RNase free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系上高質量，cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%精準調控，基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同建設應用，可對模板進(jìn)行梯度稀釋優化程度，以確定最佳的模板使用量。
2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM應用的因素之一，就可以得到較好的結(jié)果基礎，反應(yīng)效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。擴(kuò)增效率不高的情況下奮勇向前，可提高引物濃度引領作用；發(fā)生非特異性反應(yīng)時強化意識，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應(yīng)體系深入。
3. qPCR反應(yīng)程序
注意：
1） 絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果合理需求。建議采用兩步法qPCR反應(yīng)程序。一般來說基本情況，二步法擴(kuò)增特異性高先進水平，三步法擴(kuò)增效率高。如果融鏈曲線較差充分發揮，可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度共享；如果因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結(jié)果時全面展示，可嘗試加長延伸時間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增姿勢。
2） 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸（退火）溫度的設(shè)定；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調(diào)整體系。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定足夠的實力。
相關(guān)產(chǎn)品：
91011 RNAzol Reagent（Trizol）
91013 通用型總RNA快速提取試劑盒（TRIzol+吸附柱） 免氯仿，升級版
91017 動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒() 免氯仿提高，同RNeasy Mini Kit
91218 動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器) 免氯仿全面闡釋，同RNeasy Plus Mini Kit
91019 植物總RNA提取試劑盒 免氯仿，同RNeasy Plant Mini Kit
91318 多糖多酚植物總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器) 免氯仿
91513 果實/種子總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器) 難題樣本：果實結構、種子適應性強、中草藥等
71118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（With dsDNase） 同RT reagent Kit
71514 Script III RT Kit With gDNA Eraser 同RT reagent Kit with gDNA Eraser
71519 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同TB Green Premix Ex Taq
71710 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase 同T公司的AE341，V公司的R333
71600 2x Universal SYBR Green qPCR Mix 同V公司的Q711
2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光定量
