2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量
2× Universal SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑聯動，為2x 預混液結果，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分服務，可減少操作步驟數據，縮短加樣時間效率和安，降低污染幾率。2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量
2 x Universal SYBR qPCR Mix
2 x Universal SYBR qPCR Mix 熒光定量
目錄號:71711
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71711-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71711-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x Universal SYBR qPCR Mix | 1 ml x5 | 1 ml x25 |
保存條件
-20℃保存邁出了重要的一步，有效期 24 個月產能提升。使用前，充分融解，輕輕顛倒混勻發展空間，短期使用可放在 4 ℃創造性，避免反復凍融。
產(chǎn)品簡介
2× Universal SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑就此掀開，為2x 預混液能力，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分，可減少操作步驟總之，縮短加樣時間智能化，降低污染幾率。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶拓展基地，配合精心優(yōu)化的Buffer體系綜合措施，有效抑制非特異性擴增，可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量處理，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果攜手共進，具有靈敏度高、特異性強自然條件、穩(wěn)定性好等特點擴大公共數據。
預混液中含有通用型ROX，適用于所有qPCR儀體系流動性，使用qPCR Mix時不需要額外添加ROX來校正儀器設計標準。
操作步驟：
1. 將DNA模板、引物助力各行、2 x Universal SYBR qPCR Mix經過、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。
2. 冰上配制qPCR反應體系：（以20μl反應體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2 x Universal SYBR qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
RNase-free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
注意：
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系互動互補，cDNA原液≤總反應體系的10%核心技術體系，基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同力度，可對模板進行梯度稀釋配套設備，以確定最佳的模板使用量。
2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM性能，就可以得到較好的結(jié)果，反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進行調(diào)整優勢。擴增效率不高的情況下設計，可提高引物濃度；發(fā)生非特異性反應時品率，可降低引物濃度善謀新篇，由此優(yōu)化反應體系。
3. qPCR反應程序
注意：1） 本產(chǎn)品兼容性強，絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果供給。一般來說不斷發展，二步法擴增特異性高，三步法擴增效率高拓展應用。如果融鏈曲線較差高效節能，可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度；如果因使用Tm值較低的引物等原因取得明顯成效，得不到良好的實驗結(jié)果時基地，可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增。
2） 根據(jù)引物的Tm值進行退火&延伸（退火）溫度的設定大力發展；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調(diào)整約定管轄。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定。
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