2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量
2x Universal Probe qPCR Mix(UDG+)是探針法專用的qPCR試劑，為2x預混液，試劑中引入了dNTP/UDG防污染系統(tǒng)凝聚力量，可消除擴增產(chǎn)物污染對qPCR的影響。適用于DNA或cDNA的靶序列檢測效高性、基因表達分析各有優勢、拷貝數(shù)分析、SNP分型等更合理。2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量
2x Universal Probe qPCR Mix (UDG+)
2×Universal probe qPCR Mix(UDG+)熒光定量
目錄號：71400
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71400-500 500 rxns(20μl/rxn) | 71400-2500 2500rxns(20μl/rxn) |
2x Universal Probe qPCR Mix (UDG+) | 1.25 ml x4 | 1.25 ml x20 |
RNase-Free H2O | 5 ml | 5 ml x5 |
保存條件
-20℃保存有序推進，有效期24個月。使用前顯著，充分融解深入開展，輕輕顛倒混勻，短期使用可放在4℃需求，避免反復凍融。
產(chǎn)品簡介
2x Universal Probe qPCR Mix(UDG+)是探針法專用的qPCR試劑，為2x預混液各方面，試劑中引入了dNTP/UDG防污染系統(tǒng)堅定不移，可消除擴增產(chǎn)物污染對qPCR的影響。適用于DNA或cDNA的靶序列檢測占、基因表達分析技術的開發、拷貝數(shù)分析、SNP分型等更讓我明白了。
其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶健康發展，配合精心優(yōu)化的Buffer體系，有效抑制非特異性擴增提供堅實支撐，可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量活動，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果，具有靈敏度高創造更多、特異性強還不大、穩(wěn)定性好等特點。
預混液中已添加有通用型ROX連日來，適用于各種qPCR儀保障性，使用時不需要額外添加ROX來校正儀器。
操作步驟：
1. 將DNA模板信息化技術、引物實現了超越、探針發揮重要帶動作用、2 x Universal Probe qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用確定性。
2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系：（以20μl反應(yīng)體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2 x Universal Probe qPCR Mix (UDG+) | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
Probe (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
RNase free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系明確了方向，cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%，基因組DNA的量為10-100 ng意料之外。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同必然趨勢，可對模板進行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量橋梁作用。
2） 通常引物濃度為0.25 μM文化價值，就可以得到較好的結(jié)果，反應(yīng)效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進行調(diào)整講故事。擴增效率不高的情況下單產提升，可提高引物濃度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時置之不顧，可降低引物濃度多樣性，由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
3. qPCR反應(yīng)程序
注意：
1） 本產(chǎn)品兼容性強試驗，絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果規模。一般來說，二步法擴增特異性高新格局，三步法擴增效率高作用。如果融鏈曲線較差，可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度特點；如果因使用Tm值較低的引物等原因互動式宣講，得不到良好的實驗結(jié)果時，可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增用的舒心。
2） 根據(jù)引物的Tm值進行退火&延伸（退火）溫度的設(shè)定就能壓製；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調(diào)整。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設(shè)定產能提升。
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