高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄
本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒生產體系,可體外轉錄(IVT)酶促反應中純化多達 200 μg 濃縮的高質量 RNA傳遞。du特設計的微量 sgRNA 純化柱講理論,可確保零緩沖液殘留,無交叉污染範圍,洗脫體積低至 6μl研究進展。高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄
FlashPure sgRNA Purification Kit
高效 sgRNA 純化試劑盒
高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄
目錄號:91614
產品內容
產品組成 | 91614-25 (25 次) | 91614-50 (50 次) |
Buffer MRC | 5 ml | 10 ml |
Wash Solution 1 | 6 ml | 12 ml |
Wash Solution 2/3 | 5 ml | 10 ml |
RNase-Free H2O | 5 ml | 10 ml |
sgRNA Spin Column With Collection Tubes | 25 套 | 50 套 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產品簡介
本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒,可體外轉錄(IVT)酶促反應中純化多達 200 μg 濃縮的高質量 RNA高質量。du特設計的微量 sgRNA 純化柱,可確保零緩沖液殘留緊密相關,無交叉污染大幅增加,洗脫體積低至 6μl。
在高鹽條件下重要組成部分,RNA 與硅膠吸附膜高效服務延伸、專一地結合,經過漂洗步驟傳承,最后 RNA 被 RNase-Free H2O洗脫下來貢獻力量,最大限度地去除了不需要的 NTP、蛋白質具有重要意義、無機鹽離子和許多有機雜質等前景,確保在 IVT/RNA 合成反應后獲得高純度的 RNA 轉錄本。洗脫后的 RNA 可用于多種下游應用勃勃生機,包括 RT-PCR進一步、NGS、RNA 文庫制備多種、Northern blot發行速度、Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯微注射強大的功能、RNA標記積極拓展新的領域、 RNA 干擾、轉染等下游實驗與時俱進。
本試劑盒不但可以純化 miRNA 等各種小的 RNA應用,也可以純化大片段的 mRNA 等 RNA。還適用于從酶反應液(如 DNase 處理更優質、體外轉錄動力、RNA 加帽、蛋白酶處理方案、RNA 標記等)中純化回收 RNA多種方式,也可用于
從其它方式提取獲得的 RNA 的純化。
適用范圍
適用于回收≥15nt 的單鏈 RNA 或者雙鏈 RNA實施體系。
產品特點
1. 快速:步驟少臺上與臺下,操作簡便幅度,整個操作僅需 15 分鐘。
2. 高效:du特配方使本產品比一般試劑盒回收效率大大提高便利性,并且不會抑制下游反應開展研究。
注意事項
1. 使用前請檢查 Buffer MRC 是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象信息化,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘力量,即可恢復澄清。
2. 所有步驟均可以在室溫進行,但是應該迅速操作方式之一,減少 RNA 降解機會。
3. Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入無水乙醇后深刻認識,可以在常溫保存首要任務。
4. Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用幾天后出現(xiàn)沉淀晶體,并不影響使用新型儲能,不吸晶體深入實施,直接吸上清使用就可以。
操作步驟
提示:
第一次使用前請先在 Wash Solution 1 瓶和 Wash Solution 2/3 瓶中加入無水乙醇不同需求,加入體積請參照瓶上的標簽業務指導,并打對勾標記。
1. 于冰上發展空間,用 RNase-Free H2O 將 RNA 樣品補足至 100 μl溝通協調,加入 200 μl Buffer MRC,輕柔混勻提供堅實支撐。
2. 加入 375 μl (1.25 倍體積)無水乙醇活動,混勻,無需離心創造更多。
注意:如果希望回收大于 25nt 的 RNA還不大,加 1.25 倍體積無水乙醇就可以;
如果希望回收大于 15nt 的 RNA連日來,可以加 2 倍體積無水乙醇保障性。
3. 將上一步所得溶液加入一套吸附柱中(吸附柱套在收集管內),13,000 rpm 離心 30 sec信息化技術,棄濾液領先水平,將吸附柱重新套回收集管。(吸附柱的最大容量是 700 ul責任製,溶液較多時效率,可分兩次進行)
4. 加入 700 μl Wash Solution 1(請先檢查是否已加入無水乙醇!),13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液建言直達。
5. 漂洗:加入 500ul Wash Solution 2/3大幅拓展,13,000 rpm 離心 30 sec,棄濾液大部分。
6. 二次漂洗:重復步驟 5 一次重要工具。
7. 干燥:將離心吸附柱于 13,000 rpm 離心 2 min,甩干殘留漂洗液更加堅強。
8. 洗脫:將吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中提供有力支撐,在吸附膜的中央懸空滴加 10 ~ 20 μl RNase-Free H2O,室溫放置 2 min配套設備,13,000 rpm 離心 1 min發展成就,收集 RNA 片段。
注意:為增加回收效率引領作用,可將 RNase-Free H2O 在 80℃預熱,也可將得到的溶液重新加入到離心管中經驗,室溫放置 2 min,再次離心收集。
減少洗脫液(RNase-Free H2O)的體積可以提高 RNA 濃度敢於監督,但是zui低洗脫液體積不應少于 6μl對外開放。
高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉錄