高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉(zhuǎn)錄
本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒生產效率,可體外轉(zhuǎn)錄(IVT)酶促反應(yīng)中純化多達(dá) 200 μg 濃縮的高質(zhì)量 RNA。du特設(shè)計的微量 sgRNA 純化柱部署安排,可確保零緩沖液殘留競爭激烈,無交叉污染,洗脫體積低至 6μl效果。高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉(zhuǎn)錄
FlashPure sgRNA Purification Kit
高效 sgRNA 純化試劑盒
高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉(zhuǎn)錄
目錄號:91614
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品組成 | 91614-25 (25 次) | 91614-50 (50 次) |
Buffer MRC | 5 ml | 10 ml |
Wash Solution 1 | 6 ml | 12 ml |
Wash Solution 2/3 | 5 ml | 10 ml |
RNase-Free H2O | 5 ml | 10 ml |
sgRNA Spin Column With Collection Tubes | 25 套 | 50 套 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡介
本試劑盒是一款快速可靠的 sgRNA 專用的純化試劑盒學習,可體外轉(zhuǎn)錄(IVT)酶促反應(yīng)中純化多達(dá) 200 μg 濃縮的高質(zhì)量 RNA。du特設(shè)計的微量 sgRNA 純化柱優化上下,可確保零緩沖液殘留改革創新,無交叉污染,洗脫體積低至 6μl發揮重要作用。
在高鹽條件下自行開發,RNA 與硅膠吸附膜高效、專一地結(jié)合取得顯著成效,經(jīng)過漂洗步驟處理方法,最后 RNA 被 RNase-Free H2O洗脫下來,最大限度地去除了不需要的 NTP責任、蛋白質(zhì)服務、無機(jī)鹽離子和許多有機(jī)雜質(zhì)等特征更加明顯,確保在 IVT/RNA 合成反應(yīng)后獲得高純度的 RNA 轉(zhuǎn)錄本。洗脫后的 RNA 可用于多種下游應(yīng)用啟用,包括 RT-PCR、NGS、RNA 文庫制備活動上、Northern blot達到、Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯微注射大型、RNA標(biāo)記的可能性、 RNA 干擾、轉(zhuǎn)染等下游實驗不可缺少。
本試劑盒不但可以純化 miRNA 等各種小的 RNA系列,也可以純化大片段的 mRNA 等 RNA。還適用于從酶反應(yīng)液(如 DNase 處理服務為一體、體外轉(zhuǎn)錄方案、RNA 加帽、蛋白酶處理相互配合、RNA 標(biāo)記等)中純化回收 RNA統籌發展,也可用于
從其它方式提取獲得的 RNA 的純化。
適用范圍
適用于回收≥15nt 的單鏈 RNA 或者雙鏈 RNA積極回應。
產(chǎn)品特點
1. 快速:步驟少慢體驗,操作簡便,整個操作僅需 15 分鐘全會精神。
2. 高效:du特配方使本產(chǎn)品比一般試劑盒回收效率大大提高製高點項目,并且不會抑制下游反應(yīng)。
注意事項
1. 使用前請檢查 Buffer MRC 是否出現(xiàn)渾濁的過程中,如有混濁現(xiàn)象物聯與互聯,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清延伸。
2. 所有步驟均可以在室溫進(jìn)行有很大提升空間,但是應(yīng)該迅速操作要求,減少 RNA 降解機(jī)會。
3. Wash Solution 1 和 Wash Solution 2/3 加入無水乙醇后,可以在常溫保存運行好。
4. Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用幾天后出現(xiàn)沉淀晶體國際要求,并不影響使用,不吸晶體同期,直接吸上清使用就可以新趨勢。
操作步驟
提示:
第一次使用前請先在 Wash Solution 1 瓶和 Wash Solution 2/3 瓶中加入無水乙醇可能性更大,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽,并打?qū)礃?biāo)記新體系。
1. 于冰上使命責任,用 RNase-Free H2O 將 RNA 樣品補足至 100 μl,加入 200 μl Buffer MRC搖籃,輕柔混勻持續創新。
2. 加入 375 μl (1.25 倍體積)無水乙醇,混勻使用,無需離心分析。
注意:如果希望回收大于 25nt 的 RNA,加 1.25 倍體積無水乙醇就可以不難發現;
如果希望回收大于 15nt 的 RNA合規意識,可以加 2 倍體積無水乙醇。
3. 將上一步所得溶液加入一套吸附柱中(吸附柱套在收集管內(nèi))推動,13,000 rpm 離心 30 sec協調機製,棄濾液,將吸附柱重新套回收集管有效性。(吸附柱的最大容量是 700 ul先進水平,溶液較多時,可分兩次進(jìn)行)
4. 加入 700 μl Wash Solution 1(請先檢查是否已加入無水乙醇!)充分發揮,13,000 rpm 離心 30 sec提供了遵循,棄濾液。
5. 漂洗:加入 500ul Wash Solution 2/3能運用,13,000 rpm 離心 30 sec利用好,棄濾液。
6. 二次漂洗:重復(fù)步驟 5 一次講理論。
7. 干燥:將離心吸附柱于 13,000 rpm 離心 2 min有望,甩干殘留漂洗液。
8. 洗脫:將吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中解決問題,在吸附膜的中央懸空滴加 10 ~ 20 μl RNase-Free H2O服務效率,室溫放置 2 min,13,000 rpm 離心 1 min導向作用,收集 RNA 片段蓬勃發展。
注意:為增加回收效率,可將 RNase-Free H2O 在 80℃預(yù)熱問題,也可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置 2 min,再次離心收集重要性。
減少洗脫液(RNase-Free H2O)的體積可以提高 RNA 濃度重要組成部分,但是zui低洗脫液體積不應(yīng)少于 6μl貢獻力量。
高效sgRNA純化試劑盒 T7體外轉(zhuǎn)錄