T4 DNA Ligase T4原理載體及其他
T4 DNA Ligase 是從表達(dá)T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)文化價值。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接增多，修復(fù)雙鏈DNA、RNA應用提升、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口不同需求。T4 DNA Ligase T4原理載體及其他
T4 DNA Ligase
T4 DNA Ligase T4原理載體及其他
目錄號(hào)：42017
試劑盒組成、包裝：
組成 | 50U(42017-50) | 100U(42017-100) | 300U(42017-300) |
T4 DNA ligase | 50U | 100U | 300U |
10 ′ Ligation Buffer | 40ml | 80ml | 120ml |
濃度： 5U/ml
儲(chǔ)運(yùn)溫度：-20℃（保存6個(gè)月）
制品說明：T4 DNA Ligase 是從表達(dá)T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來的統籌發展。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)品質。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接，修復(fù)雙鏈DNA慢體驗、RNA深化涉外、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。
適用范圍：（1）DNA片段和載體DNA快速連接左右；
（2）限制酶切片段的克掠诌M了一步。?/span>
（3）將DNA片段與Linker或Adaptor連接生產製造。
酶貯存緩沖液：
20mM Tris-HCl (pH7.5)拓展基地， 0.1 mM EDTA， 1mM DTT多元化服務體系， 50 mM KCl處理， 50% glycerol。
10×Ligation Buffer：
400 mM Tris-HCl實力增強， 100 mM MgCl2等特點， 100 mM DTT，5 mM ATP(PH7.8)，其他成分不合理波動。
建議連接反應(yīng)體系： (以 10 μl 反應(yīng)體系為例)
標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)管 | 陽性對照管 | |
Vector | ml | ml |
PCR產(chǎn)物 | n ml ** | / |
對照插入DNA片段 | / | 1ml |
T4 DNA連接酶(5U/ml) | 2～5U | 2～5U |
10×Ligation Buffer | 1ml | 1ml |
加去離子水至終體積 | 10ml | 10ml |
反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置：
粘端連接：22oC反應(yīng)10分鐘(可根據(jù)需要延長到1小時(shí))；也可以16oC反應(yīng)1-5小時(shí)大幅拓展。
平端連接：22oC反應(yīng)2小時(shí)或16 oC過夜助力各業。
T4 DNA Ligase T4原理載體及其他
